Thermo Scientific™ Pierce™ Classic IP Kit

Das Classic IP Kit enthält alle notwendigen Reagenzien, Einsätze und Sammelröhrchen, um auf einfache Wiese erfolgreiche IP-Experimente (Immunpräzipitation) durchzuführen. Das Kit beruht auf der Verwendung von hochwertigem Protein A/G Agarose-Affinitätsharz zur wirksamen Bindung von IP-Antikörpern der meisten Spezies und Unterklassen. Im Vergleich zur herkömmlichen Methode, die auf dem Kochen in reduzierendem Probenpuffer für SDS-PAGE besteht, sorgt der im Lieferumfang enthaltene IgG-Elutionspuffer auf mildere und weniger denaturierende Weise für die Rückgewinnung der Antikörper-Antigen-Komplexe. Dadurch erweitert sich das Spektrum an Methoden, die im Rahmen nachfolgender Analyseschritte einsetzbar sind. Das auf Mikrozentrifugationssäulen beruhende Format trägt zur effektiven Wäsche und Trennung der Proben vom Affinitätsharz auf Basis von Agarose-Beads bei.

Wie klassische IP-Methoden sieht das Pierce Classic IP Protokoll die Bildung von Antikörper-Antigen-Komplexen in einer Probenlösung vor. Im nächsten Schritt werden diese Komplexe durch ein IgG-bindendes, kovalent an die Agarose-Beads gebundenes Protein eingefangen (Protein A/G Agarose). Nachdem die ungebundenen (und daher vermutlich unerwünschten) Komponenten aus der Probe gewaschen wurden, wird diese mit einem im Kit enthaltenen Elutionspuffer behandelt, um Antigen und Antikörper von den Beads zu lösen. Das gesamte Verfahren läuft in der Mikrozentrifugationssäule ab, um die Lösungen durch eine kurze Zentrifugation einwandfrei vom Agarose Resin zu trennen.

Leistungsmerkmale:

• Konsistente Assays – Spin-Säulen eliminieren Harzverluste, verbessern die Probenrückgewinnung und gewährleisten eine effiziente Trennung vom Harz

• Einfaches Protokoll – Immunpräzipitate (IP) zielen in nur vier einfachen Schritten auf Proteine aus Rohlysaten ab

• Schnell – Durchführen einer gesamten Immunpräzipitationsuntersuchung in weniger als einer Stunde

• Kostengünstig – Wiederverwendung des Protein A/G Agaroseharzes für zukünftige Immunpräzipitationen

• Komplett – Das Kit enthält ein kompatibles Zelllysereagenz und ausreichend Komponenten für mindestens 50 IP-Untersuchungen

Lieferumfang:

Pierce Protein A/G Plus Agarose, Lyse-/Waschpuffer, Einstell-Puffer, TBS, Elutionspuffer, Probenpuffer zur Spurenmarkierung, Agarose Resin zur Kontrolle, Zentrifugationssäulen und Sammelröhrchen

Empfohlen für:

Herkömmliche IP-Experimente; Immunpräzipitation für die Analyse unter nicht reduzierenden Bedingungen