Thermo Scientific™ Pierce™ Renilla-Firefly Luciferase Dual Assay Kit

Das Pierce Renilla-Firefly Luziferase Dual Assay Kit ist ein hochempfindlicher Assay, der den gleichzeitigen Nachweis von Green Renilla- und Red Firefly-Luziferase-Aktivität ermöglicht. Green Renilla-Luziferase fungiert als experimenteller Reporter mit konstitutiv aktivem Red Firefly als Normalisierungskontrolle. Diese Kombination aus Reporter und Kontrolle ermöglicht die gleichzeitige Überwachung experimenteller Reporter- und Kontrollaktivitäten von Luziferase in einem Single-Read-Assay, ohne dass eine Zugabe von Substratreagenzien oder ein Quenching in zwei Schritten erforderlich ist. Die Assay-Arbeitslösung enthält Substrate für beide Luziferasen, und die Reaktionen erfolgen gleichzeitig mit der Flash-Kinetik. Die daraus resultierenden lumineszenten Signale sind mit Filtern spektral auflösbar. Mit einer einzigen Probe können Forscher die transkriptionelle Aktivität von regulatorischen Elementen, Signaltransduktionswegen und die Auswirkungen von Aktivatoren oder Inhibitoren testen.

Leistungsmerkmale:

• Gleichzeitig – Gleichzeitiger, filterbasierter, wellenlängengetrennter Nachweis von zwei Luziferase-Aktivitäten

• Empfindlich – Messung der Aktivität von Green Renilla- und Red Firefly-Luziferase in derselben Probe

• Schnell – Im Gegensatz zu herkömmlichen sequenziellen Dual-Assays ist kein Quenching-Schritt erforderlich

• Multiplex – Quantifizierung von zwei zellulären Aktivitäten in derselben (denselben) Probe(n) möglich

Im Lieferumfang enthalten:

Zelllysepuffer, Reaktionspuffer und die Substrate Coelenterazin und D-Luziferin

Erfordert:

Green Renilla und Red Firefly Luziferase-Reporter; Filtersätze bei 525 nm ± 20 nm für Green Renilla Luc und 615 bis 675 nm für Red Firefly Luc. Luminometer oder ein anderes Gerät zur Überwachung der Lumineszenz, z. B. Thermo Scientific Luminoskan Ascent und Varioskan Flash Mikrotiterplatten-Lesegeräte; Injektor für die Bewertung von mehr als 24 Wells auf einmal erforderlich.

Empfohlen für:

Gleichzeitige Untersuchung von zwei regulatorischen Elementen; gleichzeitige Überwachung von zwei Signalwegen; Möglichkeit der Untersuchung von mehr als einem Ziel pro Screening (z. B. Off-Target-Effekte)