Thermo Scientific™ Pierce™ Silver Stain Kit

Das Pierce Silberfärbemittelkit ist ein schnelles, extrem empfindliches und vielseitiges System zur Silberfärbung von Proteinen in Polyacrylamidgelen, das konsistente und zuverlässige Ergebnisse bietet. Es ist eine metallische Silber(Ag)-Proteinfärbung, die einen überaus klaren und einheitlichen Gelhintergrund ergibt. In Standard-Minigelen sind Proteine bei mehr als 0,25 ng pro Bande oder Punkt nachweisbar. Das Protokoll wurde für Flexibilität optimiert, indem es ein Schnellverfahren oder eine Fixierung und Färbung über Nacht zulässt, ohne Abstriche bei der Qualität der Färbung (Sensitivität oder Klarheit). Eine kurze (einminütige) Sensibilisierung, die nach der Gelfixierung erfolgt, ermöglicht Ergebnisse ohne den sonst typischen dunklen oder fleckigen Hintergrund, der oft bei selbst hergestellten oder anderen kommerziell verfügbaren Silberfärbungen auftritt. Diese Eigenschaft ist bei der densitometrischen Analyse silbergefärbter Gele besonders nützlich.

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Merkmale:
• Empfindlichkeit – erkennt Proteine bei 0,25 ng
• Protokoll – Gelfärbung kann innerhalb von 5 min bis 20 h durchgeführt werden, je nach gewünschter Empfindlichkeit
• Gel-Kompatibilität – hervorragende Färbeergebnisse mit verschiedenen kommerziellen Fertiggelen für Minigelsysteme und Puffersystemen für SDS-PAGE
• Kompatibel mit vielen Arbeitsabläufen – sanfte chemische Rezeptur gewährleistet Eignung für Massenspektrometrie, Sequenzierung und weitere nachgelagerte Verfahren, die eine Entfärbung und Proteinrückgewinnung erfordern

Bei der Silberfärbung werden in der Regel entweder Glutaraldehyd oder Formaldehyd verwendet, was in einigen Fällen zu einer kovalenten Vernetzung von Proteinen untereinander und mit der Gelmatrix führen kann. Diese Vernetzung hemmt die anschließende Extraktion oder Elution des Proteins aus dem Gel. Pierce Silver Stain verwendet Formaldehyd in Färbungs- und Entwicklerlösungen, die Konzentration ist jedoch so niedrig, dass eine irreversible Proteinvernetzung minimiert wird.