Invitrogen™ SYBR™ Green Fast Advanced Cells-to-CT™ Kit

Das SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct Kit ist ein vollständiges Zelllysat-System, das für die Genexpressionsanalyse direkt aus kultivierten Zellen ohne RNA-Aufreinigung entwickelt wurde. SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct Zelllysereagenzien werden mit dem Cells-to-Ct Fast Advanced Enzymgemisch für reverse Transkription mit höchster Empfindlichkeit, 2X RT-Puffer und erstklassigem PowerUp SYBR Green Master Mix bereitgestellt. Das SYBR Green Fast Advanced Cells-to-Ct Kit bietet die erforderliche Empfindlichkeit im schnellsten verfügbaren Arbeitsablauf: Erhalten Sie die Ergebnisse Ihrer Genexpressionsanalyse einer gesamten Mikrotiterplatte mit Zellen in ca. 1,5 Stunden.

• Umfassend – der optimierte Arbeitsablauf umfasst Zelllysereagenzien zur gDNA-Entfernung, das neue Fast Advanced RT Enzymgemisch und den Puffer sowie den neuen PowerUp SYBR Green Fast Advanced Master Mix
• Schnell – Probenvorbereitung bei Raumtemperatur in 7 Minuten, einschließlich DNase-Behandlung
• Einfach – Lyse der Proben in einem Röhrchen oder direkt in Kulturplatten
• Robust – Genexpressionsanalysen mit 10 bis 100.000 Zellen pro Probe; Ergebnisse wie bei aufgereinigter RNA
• Effizient – enthält genügend Reagenzien für 1.000 Real-Time-PCR-Ergebnisse von 100 Ausgangsproben

Einzigartige Methode ohne Isolierung von RNA aus kultivierten Zellen
Die Cells-to-Ct Methode bietet ein einzigartiges Lysereagenz, das die Zellen lysiert und die RNA schützt. Die DNA-Entfernung erfolgt zeitgleich im 5-minütigen Lyseschritt, um Zeit zu sparen und die Anwenderfreundlichkeit zu verbessern. Die Lyse wird dann durch Zugabe einer „Stopplösung“ gestoppt, die irreversibel an die Lysereagenzien bindet.

Das SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT Kit enthält Reagenzien für die reverse Transkription (RT) für die cDNA-Synthese und den PowerUp SYBR Green Master Mix für die Real-Time PCR-Analyse. Die Primersätze werden vom Anwender bereitgestellt.

Einfache, 7-minütige Probenvorbereitung
Das SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT Kit ist für 10 bis 100.000 kultivierte Zellen/Probe konzipiert. Die Zellen werden in PBS gewaschen und fünf Minuten lang bei Raumtemperatur in Lyselösung lysiert; die DNase-Behandlung kann gleichzeitig erfolgen. Die Lyse wird bei Raumtemperatur durch 2-minütige Inkubation mit Stopplösung beendet. Die Lysate sind nun für die reverse Transkription oder Lagerung bei -20 °C über einen kurzen Zeitraum oder bei -80 °C über einen längeren Zeitraum bereit.

Maximale Nachweisempfindlichkeit
Im Gegensatz zu einigen Kits von Mitbewerber-Produkten, die die Lysatmenge in der RT-Reaktion auf 10 % begrenzen, kann das SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT Kit 45 % des gesamten RT-Reaktionsvolumens als Zelllysat aufnehmen. Außerdem kann die cDNA bis zu 30 % des Real-Time-PCR-Reaktionsvolumens ausmachen. Das große Lysatvolumen in der optimierten RT-Reaktion zusammen mit dem großen cDNA-Volumen in der nachfolgenden Real-Time PCR mittels PowerUp SYBR Green Master Mix sorgen für maximale Empfindlichkeit. Der Mastermix amplifiziert Targets präzise und genau und ermöglicht so den Nachweis kleiner Target-Mengen, wie z. B. Transkripte, die in niedrigen Konzentrationen exprimiert werden.

Weniger Probenverlust und Transferfehler
Da Proben direkt in Kultur-Wells (96 oder 384 Wells) verarbeitet werden können, werden Arbeitsaufwand, Probenverluste oder Transferfehler minimiert, während die schnelle Verarbeitung hoher Durchsätze vereinfacht wird. Im Gegensatz zu altmodischen RNA-Isolierungsprotokollen mit mehreren Schritten sind weder Erwärmung, Waschen noch Zentrifugation erforderlich. Das Kit verkürzt einen mühsamen Prozess von ansonsten 30 bis 60 Minuten auf nur 7 Minuten.

Bewährte Leistung, bewährte Kombination
Alle Komponenten des SYBR Green Fast Advanced Cells-to-CT Kits wurden für eine konsistente und zuverlässige Leistung optimiert. Kein Rätselraten mehr bei der Zusammenstellung separater Kits für die Probenvorbereitung, RT und Real-Time PCR. So erhalten Sie die Empfindlichkeit, die Sie in dem schnellsten verfügbaren Arbeitsablauf für die Probenvorbereitung benötigen.