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Beschreibung
Genomische DNA wurde aus Jurkat E6.1-Zellen (humane akute T-Zellleukämie, Klon E6.1) isoliert, die in mit 10 % fötalem Kälberserum ergänzten RPMI-Medien zu Konfluenz gewachsen sind. Die isolierte genomische DNA wurde mit CpG-Methyltransferase behandelt, erneut aufgereinigt und im TE-Puffer gelöst. Der CpG-Methylierungsgrad von ≥ 98 % wurde durch Bisulfit-Sequenzierung bestätigt.
Thermo Scientific CpG Methylierte Jurkat Genom-DNA ist humane männliche genomische DNA aus Jurkat-Zellen, die enzymatisch mit CpG Methyltransferase (M.SssI) methyliert wurde. Genomische DNA wurde aus Jurkat-Zellen (humane akute T-Zellen-Leukämie) isoliert, die in mit 10 % fötalem Kälberserum ergänzten RPMI-Medien zu Konfluenz gewachsen sind. Die isolierte genomische DNA wurde mit CpG-Methyltransferase behandelt, erneut aufgereinigt und im TE-Puffer gelöst. Der Grad der CpG-Methylierung von ≥ 98 % wurde durch Bisulfit-Sequenzierung bestätigt.
Vorteile
- Rein – DNA frei von Inhibitoren, Proteinen und RNA
- Praktisch – Gebrauchsfertige Konzentration von 100 ng/μl
- Kompatibel mit nachgeschalteten Anwendungen
- Vollständige Methylierung von Zytosinen in CpG-Dinukleotiden
Anwendungen - Als Kontrollen im Folgenden:
- Bisulfit-Sequenzierung
- Kombinierte Bisulfit-Restriktionsanalyse (COBRA)
- Methylation-sensitive Single-Nucleotide Primer Extension (Ms-SNuPE)
A260/230-Verhältnis: ≥ 2
A260/280-Verhältnis: 1,75 bis 1,98
Gefährlich: Nein
Qualitätskontrolle:
- Während der Agarose-Gelelektrophorese wird ein vorherrschendes Band > 30 kb beobachtet. Die DNA-Konzentration wird spektrophotometrisch bestimmt. Anhand von Tests mit markierten Oligonukleotiden wird das Fehlen von Nukleasen bestätigt.
- Anhand einer qPCR-Analyse wird bestätigt, dass die CpG-methylierte DNA HpaII vor dem Verdau durch das methylierungssensitive Restriktionsenzym geschützt wurde. Nach der qPCR werden äquivalente Cq-Werte für HpaII-verdaute und nicht verdaute Kontroll-DNA beobachtet.
- Die DNA-Reinheit wird durch einen funktionellen qPCR-Test bestätigt, bei dem die Cq-Werte der MspI- und HpaII-verdauten Template-DNA um ≥ 5 Zyklen voneinander abweichen müssen.
- Anhand von PCR wird das Fehlen von Mykoplasma-DNA bestätigt.
Aufbewahrungspuffer: DNA wird in TE-Puffer geliefert (10 mM Tris-HCl pH 8,0, 1 mM EDTA).
Lagerungsbedingung: -20 °C
Als Kontrollen bei der Bisulfit-Sequenzierung, der Combined Bisulphite Restriction Analysis (COBRA), der Methylation-sensitive Single-Nucleotide Primer Extension (Ms-SNuPE)
Bestellinformation
Bestellungen, die montags bis mittwochs aufgegeben werden, werden am nächsten Tag verschickt; Bestellungen, die donnerstags und freitags aufgegeben werden, werden am darauffolgenden Montag verschickt.
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 100 ng/µl |
| Format | Rörchen |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | Sequenzierung |
| Enthält | [sonstige] |
| Produkttyp | CPG-Methylierte Jurkat-genomische DNA |
| Menge | 15 μg |
| Spezies | Human |
| Form | Flüssig |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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