Thermo Scientific™ RevertAid RT Kit für Umkehrtranskription

Das Kit umfasst RevertAid Reverse Transkriptase, die im Vergleich zur reversen AMV-Transkriptase eine niedrigere RNase-H-Aktivität aufweist. Der im Kit enthaltene rekombinante RiboLock RNase-Inhibitor schützt die RNA-Matrize wirksam vor Zersetzung. Vollständig kompatibel mit der reversen Transkriptionsreaktion aufgrund der Aufrechterhaltung der Aktivität bis zu einer Temperatur von 55 °C. Der Oligo(dT)₁₈-Primer bindet selektiv an den Poly(A)-Schwanz der mRNA. Für die Random-Hexamer-Primer ist die Gegenwart von Poly(A) nicht erforderlich. Daher können sie für die Transkription der 5-Endregionen von mRNA oder die cDNA-Synthese mittels RNA ohne Poly(A)-Schwanz (z. B. MikroRNA) verwendet werden. Es können auch genspezifische Primer eingesetzt werden. Der erste Strang der cDNA kann direkt als Templat bei der PCR (siehe RT-PCR-Protokoll), RT-PCR oder Synthese von Zweitstrang-cDNA (siehe Protokoll) eingesetzt werden.

Beim Thermo Scientific RevertAid Erststrang cDNA-Synthesekit handelt es sich um ein Komplettsystem für die effiziente Synthese von Erststrang-cDNA aus RNA-Templates. Das Kit eignet sich für die Synthese von cDNA bis 13 kb. Der im Kit enthaltene RiboLock RNase-Inhibitor schützt RNA-Templates wirksam vor Abbau.
Das RevertAid Erststrang-cDNA-Synthese-Kit enthält sowohl Oligo(dT)₁₈- als auch Random-Hexamer-Primer. Der Oligo(dT)₁₈-Primer bindet selektiv an den Poly(A)-Schwanz der mRNA. Für Random-Hexamer-Primer ist ein Poly(A)-Ende nicht erforderlich. Sie können daher auch für die Transkription der Bereiche am 5'-Ende der mRNA oder für die cDNA-Synthese von RNA-Arten ohne Poly(A)-Ende (z. B. MikroRNAs) verwendet werden. Es können auch genspezifische Primer eingesetzt werden.
Besondere Merkmale
• Erststrang-cDNA über die volle Länge bis zu 13 kb
• Optimale Reaktionstemperatur 42 °C
• Komplettkit – alle Komponenten für die RT-Reaktion sind im Kit enthalten
Anwendungen
• Erststrang-cDNA-Synthese für RT-PCR und RT-qPCR
• Erstellung von Bibliotheken mit Volllängen-cDNA
• Synthese von Antisense-RNA
Enthält
Das RevertAid Erststrang-cDNA-Synthese-Kit enthält RevertAid Reverse-Transkriptase, RiboLock RNase-Inhibitor, 5X Reaktionspuffer, dNTP-Mix, Random-Hexamer-Primer, GAPDH-Kontroll-RNA, 10 μM GAPDH-Vorwärtsprimer, 10 μM GAPDH-Rückwärtsprimer und nukleasefreies Wasser.
Das RevertAid RT-Kit enthält RevertAid Reverse-Transkriptase, RiboLock RNase-Inhibitor, 5X Reaktionspuffer, dNTP-Mix, Random-Hexamer-Primer und nukleasefreies Wasser.

Gefahrstoff:Nein
>Qualitätskontrolle: Das Kit wurde funktionell getestet in RT-PCR unter Verwendung von 100 fg GAPDH Kontroll-RNA und GAPDH-Kontrollprimern und erzeugte ein auf Agarose-Gel nach Ethidiumbromid-Färbung sichtbares 496 bp-Produkt.
> Lagerungsbedingungen: -20 °C

cDNA-Erststrangsynthese für RT-PCR und Real-Time RT-PCR (1, 2); Erstellung von Bibliotheken von Volllängen-cDNA; Herstellung von Sonden für die Hybridisierung; aRNA-Synthese