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Thermo Scientific™ MuA Transposase
Transposon-basierte Hilfsmittel für die funktionelle Analyse von Proteinen.
Marke: Thermo Scientific™ F750
Weitere Details : Netto-Gewicht : 0.01000kg
Beinhaltet: MuA Transposase, Entranceposon (M1-CamR), Entranceposon (M1-KanR), 5X Reaktionspuffer für MuA-Transposase, Kontroll-Ziel-DNA, NotI-Miniprimer
Beschreibung
Das Mutation Generation System™ Kit (MGS™ Kit) ist für den schnellen Aufbau von Insertion-Mutation-Bibliotheken für jede Art von DNA-Klonen konzipiert. Das System nutzt die hocheffiziente Transpositionsmaschine des Bakteriophagen My, um einen Pool von 15 bp-Insertionsmutanten zu erzeugen, die in einer Vielzahl von funktionellen Analysen der codierten Proteine oder regulatorischen DNA-Regionen verwendet werden können.
Die Thermo Scientific Transposon Produkte basieren auf dem Transpositionsmechanismus des Bakteriophages Mu. Während der lytischen Phase des Phagenlebenszyklus repliziert die Maschine ihr Genom, indem sie wiederholt in das Wirtsgenom transponiert. Die My-Transpositionsreaktion wurde zu einer In-vitro-Reaktion modifiziert, die durch ein einziges Enzym katalysiert wird – MuA Transposase. In diesem System ist eine einzige In-vitro-Reaktion in der Lage, mehr als eine Million Transposon-Insertionsklone zu erzeugen.
Merkmale
Das Mutation Generation System (MGS-Kit) und das Stop Generation System (STOP-Kit) sind für die Funktionsanalyse von Proteinen vorgesehen. Mit diesen neuen Transposon-Hilfsmitteln können gesättigte Bibliotheken von mutierten Proteinen in einer einzigen Reaktion mit kürzerer Arbeitszeit als bei jeder anderen Methode erstellt werden. Die Position der Transposon-Insertion in jedem mutierten Klon kann entweder durch PCR oder Sequenzierung abgebildet werden. Mit dem MGS-Kit und dem STOP-Kit liegen in nur 2 bis 3 Tagen Tausende mutierter Klone für Expressionsstudien vor.
Das MGS-Kit enthält den kompletten Satz an Reagenzien für die Transposon-basierte Linker-Scan-Mutagenese von Zielproteinen. Die MGS-Entranceposons dienen zur Vornahme subtiler Änderungen an der Struktur eines Zielproteins durch Einfügen von 15 bp In-Frame-Linkern in das entsprechende Zielgen. Diese In-Frame-Insertion ermöglicht die Konservierung nachgelagerter Sequenzen.
Die Entranceposons des STOP-Kits enthalten translationale Stopp-Codons in allen drei Leseframes innerhalb des terminalen Teils der Transposon-Sequenz. Die proprietäre Modifikation des Stop Generation Systems ermöglicht es, aus praktisch jedem Zielprotein mit Addition von maximal drei Aminosäuren eine gesättigte Bibliothek C-terminaler Deletionen zu erzeugen.
Besondere Merkmale
- Effizient – erstellen Sie gesättigte Insertionsbibliotheken für die Sequenzierung und Proteinanalyse in einer einzigen Reaktion
- Schnell – verringern Sie die Arbeitszeit im Vergleich zu herkömmlichen Methoden
- Zufällig – Eliminieren Sie die Präferenz für den Zielstandort oder Insertions-Hotspot
Das STOP Kit erzeugt trunkierte Proteine für Funktionsassays von:
- Enzymen
- Rezeptoren
- Strukturproteinen usw.
Das MGS-Kit erzeugt zufällige 15 Basenpaar-in-vitro-Insertionen in jede Ziel-DNA für: - Schnelle Erzeugung von fünf Aminosäure-Insertionsbibliotheken in Rahmen von Proteinen für funktionelle Analysen
- Schnelle und zufällige Mutagenese geklonter Promoter und anderer regulatorischer DNA-Regionen
- Zufällige Insertion einer Notl Restriktionsschnittstelle in einen beliebigen Ziel-DNA-Klon
- MuA-Transposase (F-750):
- MUA-Transposase (0,22 μg/μl, 20 μl)
- 5X Reaktionspuffer
- MuA-Transposase, konzentriert (1,1 μg/μl, 20 μl)
- 5X Reaktionspuffer
- MuA-Speicherpuffer
- MuA-Transposase (0,22 μg/μl in MuA-Lagerpuffer)
- Entranceposon (STOP-KanR) (100 ng/μl in TE-Puffer)
- 5X Reaktionspuffer für MuA-Transposase
- DMSO 100 %
- Kontroll-Ziel-DNA (370 ng/μl in TE-Puffer)
- MuEnd-2 Primer (25 μM in bidestilliertem Wasser)
- SeqE-Primer (10 μM in bidestilliertem Wasser)
- SeqW-Primer (10 μM in bidestilliertem Wasser)
- MuA-Transposase (0,22 μg/μl in MuA-Lagerpuffer)
- Entranceposon (M1-CamR) (100 ng/μl in TE-Puffer)
- Entranceposon (M1-KanR) (100 ng/μl in TE-Puffer)
- 5X Reaktionspuffer für MuA-Transposase
- Kontroll-Ziel-DNA (370 ng/μl in TE-Puffer)
Schnelle Erzeugung von fünf Aminosäure-Insertionsbibliotheken in Rahmen von Proteinen für funktionelle Analysen, schnelle und zufällige Mutagenese klonierter Promoter und anderer regulatorischer DNA-Regionen, zufällige Einfügung einer Notl-Restriktionsschnittstelle in einen beliebigen Ziel-DNA-Klon
Spezifikation
Lösung | |
Schnell | |
0,22 µg/µl (falsche SKU, sollte F750 sein) | |
20 µl |
Rörchen | |
Transposonprodukte | |
DNA |
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.