Invitrogen™ Exonuclease I

Exonuklease I ist besonders nützlich bei der Herstellung von PCR-Produkten für Anwendungen, die Sequenzierungs- oder Etikettierungsmethoden erfordern¹. Normalerweise stören die überschüssigen Primer und alle anderen in PCR-Produkten vorhandenen irrelevanten einzelsträngigen DNA nachfolgende enzymatische Reaktionen, die DNA-Synthese betreffen. Die hydrolytischen Eigenschaften von Exonuklease I degradieren alle in der PCR-Mischung vorhandenen einzelsträngigen DNA, wodurch das Produkt effizienter in anderen Anwendungen eingesetzt werden kann.

• Hydrolysiert einzelsträngige DNA in die Richtung 3'-5', wodurch5'-Mononukleotide freigesetzt werden und das terminale 5 '-Dinukleotid intakt bleibt; Hydrolyse ist prozessiv und kann nicht fortgesetzt werden, wenn der 3'-Terminus phosphoryliert ist
• Zur Messung der endonukleolytischen Spaltung von kovalent geschlossener, kreisförmiger, einzelsträngiger DNA, die mit einem zu untersuchenden Endonuklease reagiert²
• Auch zur Messung der DNA-Helikase-Aktivität geeignet³
• In Kombination mit Shrim-Alkalin-Phosphatase (Hersteller- Nr. 78390) für die dNTP-Dephosphorylierung sind die alternativen Reinigungsmethoden wie Säulen, Gele oder magnetische Trennungen nicht mehr notwendig

Quelle: E. coli-Stamm, der einen überproduzierenden Klon von E. coli-Exonuklease I enthält
Eigenschaften:

• Molekulargewicht: 55 kDa
• Wärme-Inaktivierung: 80° für 15 Min.
• Verringert sich auf terminale Dinukleotiden
• Degradiert glykosylierte DNA
• Optimale Temperatur: 37 °C

• Mehr als 95 % rein, wie durch SDS-PAGE bestimmt
• Getestet für kontaminierende Endonukleasen, doppelsträngigen Exonukleasen und Ribonukleasen

• Standard-Konz.: 10 Einheiten/μl, Mfr. Nr. 70073
• Hohe Konz.: 20 Einheiten/μl, Mfr. Nr. 72073

Beseitigung der verbleibenden einzelsträngigen DNA, die einen 3'-Terminus enthält; Messung der endonukleolytischen Spaltung kovalent geschlossener zirkulärer ssDNA; Messung der DNA-Helikase-Aktivität