Invitrogen™ Butyrylcholinesterase Fluorescent Activity Kit

Beschreibung

Das Kit zum Nachweisen der Butyrylcholinesterase-Fluoreszenzaktivität, das nur für Forschungszwecke verwendet wird, ist ein Fluoreszenzaktivitäts-Assay, der für die Quantifizierung und den Nachweis der Butyrylcholinesterase-Aktivität in Serum- und Plasmaproben entwickelt wurde.

Dieses vollständige, gebrauchsfertige Kit enthält schwarze 96-Well-Mikrotiterplatte(n), Butyrylcholinesterase-Standard (200 mU/ml), Butyrylcholinesterase-Substrat und andere Komponenten zur Durchführung des Assays. Für die Verwendung dieses Kits ist ein 96-Well Fluoreszenz-Mikrotiterplatten-Lesegerät erforderlich, das Fluoreszenzemissionen bei 510 nm mit Anregung bei 390 nm ablesen kann.

Leistungsmerkmale
• Assay-Typ: Fluoreszenzaktivitäts-Kit
• Probentypen: Serum- und Plasmaproben
• Empfindlichkeit: 0,018 mU/ml
• Standardkurvenbereich: 0,3 – 20 mU/ml
• Reaktivität: artunabhängig

Hintergrund
Butyrylcholinesterase (BChE) gehört zur gleichen Protein-Strukturklasse wie Acetylcholinesterase (AChE). Das tetramerische 440 kDa-Glykoprotein findet sich vorwiegend in Blut, Nieren, Darm, Leber, Lunge, Herz und im zentralen Nervensystem. Viele Arten wie Mensch, Pferd und Mäuse weisen eine hohe BChE-Aktivität im Plasma auf, während Ratten im Plasma1 eine höhere Acetylcholinesterase-Aktivität aufweisen. BChE wirkt bevorzugt auf Butylcholin, hydrolisiert jedoch auch Acetylcholin. Dieser Assay wurde für Serum-, EDTA- und Heparinplasmen einer Vielzahl von Spezies validiert.

Assay-Prinzip
Das Butyrylcholinesterase-Aktivitätskit wurde entwickelt, um die Butyrylcholinesterase-Aktivität in einer Vielzahl von Proben quantitativ zu bestimmen. Ein humaner BChE-Standard wird zur Erstellung einer Standardkurve für den Assay bereitgestellt, und alle Proben sollten von der Standardkurve abgelesen werden. Das Kit verwendet ein firmeneigenes, nicht fluoreszierendes Nachweisreagenz, das kovalent an das Thiolprodukt der Reaktion zwischen dem BChE-Substrat und BChE in den Standards oder Proben bindet und ein Fluoreszenzprodukt ergibt, das bei 510 nm in einem Fluoreszenz-Plattenlesegerät mit Anregung bei 390 nm abgelesen wird. Das Kit eignet sich zur Messung der BChE-Aktivität in entsprechend verdünntem Serum oder Plasma einer Reihe von Spezies. Außerdem wird BChE in extrahierten Gewebeproben, CSF und Zelllysaten gemessen.

Definition einer Einheit BChE
Eine Einheit hydrolysiert 1,0 μmol Butylcholin zu Cholin und Butyrat pro Minute bei pH 8,0 und 37 °C.