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Beschreibung
Thermo Scientific DNase I, RNase-frei ist eine Endonuklease, die einzel- und doppelsträngige DNA spaltet. Sie hydrolysiert Phosphodiesterbindungen und produziert somit Mono- und Oligodeoxyribonucleotide mit 5'-Phosphat- und 3'-OH-Gruppen.
Die Enzymaktivität ist stark von Ca2+ abhängig und wird durch Mg2+- und Mn2+-Ionen aktiviert.
- In Anwesenheit von Mg2+ spaltet DNase I jeden DNA-Strang der dsDNA unabhängig und in statistisch willkürlicher Weise
- In Anwesenheit von Mn2+ spaltet das Enzym beide DNA-Stränge an etwa der gleichen Stelle und erzeugt damit DNA-Fragmente entweder mit glatten Enden oder mit überhängenden Enden von nur einem oder zwei Nukleotiden
Besondere Eigenschaften
- Rekombinantes Enzym
- Gereinigt aus einem nicht tierischen Wirt mit weniger eigenen RNasen
Anwendungen
- Präparation von DNA-freier RNA
- Entfernung von Template-DNA nach In-vitro-Transkription
- Präparation von DNA-freier RNA vor RT-PCR und RT-qPCR
- DNA-Markierung durch Nick-Translation in Verbindung mit DNA-Polymerase I
- Untersuchungen von DNA-Protein-Interaktionen durch DNase I (RNase-frei) Footprinting
- Erzeugung einer Bibliothek zufällig überlappender DNA-Inserts Verwendung von Reaktionspuffer mit Mn2+
Hinweis
DNase I ist anfällig im Hinblick auf physikalische Denaturierung. Durch Invertieren des Röhrchens vorsichtig mischen. Nicht vortexen.
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 50 U/μl |
| Enzym | DNase |
| Kompatibler Puffer | Reaktionspuffer |
| Menge | 1000 E |
| Produkttyp | DNase I, RNase-frei |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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