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Thermo Scientific™ FastAP wärmeempfindliche alkalische Phosphatase (1 U/μl)
Katalysieren Sie die Entfernung von 5'- und 3'-Phosphatgruppen aus DNA, RNA, Nukleotiden und Proteinen mit dieser thermosensitiven alkalischen Phosphatase.
Marke: Thermo Scientific™ EF0651
79.44 EUR gültig bis 2024-12-31
Benutzen Sie den Promotions-Code "21884" um Ihren Promotions-Preis zu erhalten.
Weitere Details : Netto-Gewicht : 0.01000kg
Beschreibung
FastAP Thermosensitive alkalische Phosphatase katalysiert die Abgabe von 5'- und 3'-Phosphatgruppen aus DNA, RNA und Nukleotiden. Dieses Enzym entfernt zudem Phosphatgruppen aus Proteinen.
FastAP ist eine neuartige alkalische Phosphatase, die in allen Thermo Scientific Restriktionsenzympuffern und PCR-Puffern aktiv ist. Es dephosphoryliert alle Arten von DNA-Enden (stumpfe, 5'- und 3'-Überhänge) in 10 Minuten bei 37°C. Das Enzym wird in 5 Minuten bei 75°C inaktiviert. Aus diesem Grund ist es nicht mehr erforderlich, die alkalische Phosphatase vor der Ligation zu entfernen.
Besondere Eigenschaften
- Rekombinantes Enzym
- Schnelle Dephosphorylierung – 10 Minuten bei 37°C
- Rasche und vollständige Inaktivierung – 5 Minuten bei 75°C
- Gleichzeitiger Verdau und Dephosphorylierung von Vektor-DNA
- 100 % aktiv in Restriktionsenzym- und PCR-Puffern
- Ein Protokoll für alle Arten von DNA-Enden:
- 5’-Überhänge
- 3’-Überhänge
- stumpfe Enden
- einzelne Nukleotide
- PCR-Aufreinigung in Verbindung mit Exo I
- Protein-Dephosphorylierung
Anwendungen
- Dephosphorylierung von Vektor-DNA zur Klonierung, um eine Rezirkulation während der Ligation zu verhindern.
- Gleichzeitiger Verdau und Dephosphorylierung von Vektor-DNA
- PCR-Aufreinigung: Nukleotidabbau vor der Sequenzierung des PCR-Produkts
- Dephosphorylierung von Nukleinsäure-5'-Termini vor der Markierung mit T4 Polynukleotid-Kinase
- Andere Anwendungen, bei denen Dephosphorylierung von DNA- und RNA-Substraten erforderlich ist
- Protein-Dephosphorylierung
Hinweis
- Die Bindung von FastAP temperaturempfindlicher alkalischer Phosphatase an die DNA kann zu einem Bandensprung des Agarose-Gels führen. Um dieses zu verhindern, inkubieren Sie die Proben 10 Minuten lang mit 6X DNA-Ladefarbstoff & SDS-Lösung bei 65°C, und kühlen Sie sie anschließend auf Eis vor Ausführung der Elektrophorese.
- FastAP Thermosensitive alkalische Phosphatase ist in allen Restriktionsenzympuffern aktiv und kann direkt zu der verdauten DNA hinzugefügt werden. Eine Wärme-Inaktivierung des Restriktionsenzyms vor der Dephosphorylierungsreaktion ist nicht erforderlich.
Spezifikation
1 U/μl | |
PCR-Puffer, Enzympuffer | |
Alkalische Phosphatase |
Phosphatase | |
1000 E |
Durch den Kauf dieses Produkts wird der Käufer berechtigt, es zur Behandlung amplifizierter DNA-Fragmente unter der Lizenz von GE Healthcare der US-Patente 5.741.676 und 5.756.285 bzw. entsprechender ausländischer Patente einzusetzen.