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Thermo Scientific™ FastAP wärmeempfindliche alkalische Phosphatase (1 U/μl)

Artikelnummer. 10819230 Alle ansehen Thermo Scientific Produkte
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Artikelnummer. 10819230

Marke: Thermo Scientific™ EF0654

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Beskrivelse

Katalysieren Sie die Entfernung von 5'- und 3'-Phosphatgruppen aus DNA, RNA, Nukleotiden und Proteinen mit dieser thermosensitiven alkalischen Phosphatase.

FastAP Thermosensitive alkalische Phosphatase katalysiert die Abgabe von 5'- und 3'-Phosphatgruppen aus DNA, RNA und Nukleotiden. Dieses Enzym entfernt zudem Phosphatgruppen aus Proteinen.

FastAP ist eine neuartige alkalische Phosphatase, die in allen Thermo Scientific Restriktionsenzympuffern und PCR-Puffern aktiv ist. Es dephosphoryliert alle Arten von DNA-Enden (stumpfe, 5'- und 3'-Überhänge) in 10 Minuten bei 37°C. Das Enzym wird in 5 Minuten bei 75°C inaktiviert. Aus diesem Grund ist es nicht mehr erforderlich, die alkalische Phosphatase vor der Ligation zu entfernen.

Besondere Eigenschaften

  • Rekombinantes Enzym
  • Schnelle Dephosphorylierung – 10 Minuten bei 37 °C
  • Rasche und vollständige Inaktivierung – 5 Minuten bei 75 °C
  • Gleichzeitiger Verdau und Dephosphorylierung von Vektor-DNA
  • 100 % aktiv in Restriktionsenzym- und PCR-Puffern
  • Ein Protokoll für alle Arten von DNA-Enden:
    • 5’-Überhänge
    • 3’-Überhänge
    • stumpfe Enden
    • einzelne Nukleotide
  • PCR-Aufreinigung in Verbindung mit Exo I
  • Protein-Dephosphorylierung

Anwendungen

  • Dephosphorylierung von Vektor-DNA zur Klonierung, um eine Rezirkulation während der Ligation zu verhindern.
  • Gleichzeitiger Verdau und Dephosphorylierung von Vektor-DNA
  • PCR-Aufreinigung: Nukleotidabbau vor der Sequenzierung des PCR-Produkts
  • Dephosphorylierung von Nukleinsäure-5'-Termini vor der Markierung mit T4 Polynukleotid-Kinase
  • Andere Anwendungen, bei denen Dephosphorylierung von DNA- und RNA-Substraten erforderlich ist
  • Protein-Dephosphorylierung

Hinweis

  • Die Bindung von FastAP temperaturempfindlicher alkalischer Phosphatase an die DNA kann zu einem Bandensprung des Agarose-Gels führen. Um dieses zu verhindern, inkubieren Sie die Proben 10 Minuten lang mit 6X DNA-Ladefarbstoff & SDS-Lösung bei 65 °C, und kühlen Sie sie anschließend auf Eis vor Ausführung der Elektrophorese.
  • FastAP temperaturempfindliche alkaline Phosphatase ist in allen Restriktionsenzympuffern aktiv und kann direkt zu der verdauten DNA hinzugefügt werden. Eine Wärme-Inaktivierung des Restriktionsenzyms vor der Dephosphorylierungsreaktion ist nicht erforderlich.
TRUSTED_SUSTAINABILITY

Tekniske data

Konzentration 1 U/μl
Enzym Phosphatase
Kompatibler Puffer PCR-Puffer, Enzympuffer
Menge 300 E
Produkttyp Alkalische Phosphatase

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

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