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Beschreibung
Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.
5'...C C A N N N N N▵N T G G...3'
3'...G G T N▵N N N N N A C C...5'
Bedingungen für 100 % Aktivität:
- b1X Puffer O: 50 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl2, 100 mM NaCl und 0,1 mg/ml BSA
- Bei 55°C inkubieren
Lagerungspuffer:
- BstXI wird geliefert in: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 25°C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
Ligation und erneutes Schneiden:
- Nach 50-fachem Verdau mit BstXI können ungefähr 95 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden
Methylierungseffekte:
- Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
- Dcm: kann überlappen — Spaltung behindert
- CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoBI: keine Überlappung — keine Auswirkung
Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:
- Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich
Hinweis:
Inkubation bei 37°C ergibt 50% Aktivität. Ein mehr als 15-facher Überverdau mit BstXI kann zu Star-Aktivität führen. BstXI-Spaltung wird durch überlappende dcm-Methylierung behindert. Verwenden Sie zur Vermeidung von dcm-Methylierung einen dam-, dcm-Stamm wie z. B. GM2163 (Nr. M0099).
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 10 U/μl |
| Methylierungsempfindlichkeit | Nicht empfindlich für Dam-Methylierung, nicht empfindlich für CpG-Methylierung, nicht empfindlich für CpG-Methylierung |
| Enzym | BstXI |
| Kompatibler Puffer | 10x Puffer O |
| Empfindlich gegen Hitzeinaktivierung | Ja |
| Optimale Reaktionstemperatur | 55°C |
| Typ IIS RE | Nein |
| Menge | 500 E |
| Produkttyp | Restriktionsenzym |
| Forschungskategorie | Herkömmliches Klonen |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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