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Beschreibung
Lambda-DNA verdaut mit Eco105I (SnaBI), 0,7 % Agarose, 1 Spaltstellen
Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.
5'...T A C▵G T A...3'
3'...A T G▵C A T...5'
Bedingungen für 100 % Aktivität:
- 1x Puffer Tango™:
- 33 mM Tris-acetat (pH 7,9 bei 37°C), 10 mM Mg-Acetat, 66 mM K-Acetat und 0,1 mg/ml BSA.Inkubat bei 37°C
Lagerungspuffer:
- Eco105I wird geliefert in:10 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 1 mM Phenylmethylsulfonylfluorid, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
Ligation und erneutes Schneiden:
- Nach 10-fachem Verdau mit Eco105I können über 80 % der M13mp18-DNA-Fragmente in einem Reaktionsgemisch mit 20 bis 40 U von T4 DNA-Ligase/1 μg Fragmente und 10 % PEG ligiert werden
- Mehr als 90% davon können erneut geschnitten werden
Methylierungseffekte:
- Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
- Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
- CpG: vollständige Überlappung — blockiert
- EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoBI: keine Überlappung — keine Auswirkung
Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:
- Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich
Hinweis:
Ein mehr als 15-facher Überverdau mit Eco105I kann zu Star-Aktivität führen.
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 10 U/μl |
| Methylierungsempfindlichkeit | Empfindlich für CpG-Methylierung, nicht empfindlich für Dam-Methylierung und Dcm-Methylierung, nicht empfindlich für Dam-Methylierung und Dcm-Methylierung, Not Dcm Methylation-Sensitive |
| Enzym | Eco105I (SnaBI) |
| Kompatibler Puffer | 10x Puffer Tango |
| Empfindlich gegen Hitzeinaktivierung | Ja |
| Optimale Reaktionstemperatur | 37°C |
| Typ IIS RE | Nein |
| Menge | 600 E |
| Produkttyp | Restriktionsenzym |
| Forschungskategorie | Herkömmliches Klonen |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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