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Beschreibung
Lambda-DNA verdaut mit Eco147I (StuI), 0,7 % Agarose, 6 Spaltstellen
Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.
5'...A G G▵C C T...3'
3'...T C C▵G G A...5'
Bedingungen für 100 % Aktivität:
- 1x Puffer B:10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl2 und 0,1 mg/ml BSA
- Bei 37°C inkubieren
Lagerungspuffer:
- Eco147I wird geliefert in:
- 10 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
Ligation und erneutes Schneiden:
- Nach 50-fachem Verdau mit Eco147I können über 90 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden
Methylierungseffekte:
- Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
- Dcm: möglicherweise Überlappung — blockiert
- CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoBI: möglicherweise Überlappung — Auswirkung unbestimmt
Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:
- Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich
Hinweis:
Eco147I wird durch überlappende dcm-Methylierung blockiert. Verwenden Sie zur Vermeidung von dcm-Methylierung einen dam- oder dcm-Stamm wie z. B. GM2163 (Nr. M0099).
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 10 U/μl |
| Methylierungsempfindlichkeit | Nicht empfindlich für Dcm-Methylierung, Dam-Methylierung und CpG-Methylierung, Dam-Methylierung und CpG-Methylierung, Not CpG Methylation-Sensitive |
| Enzym | Eco147I (StuI) |
| Kompatibler Puffer | 10x Puffer B |
| Empfindlich gegen Hitzeinaktivierung | Ja |
| Optimale Reaktionstemperatur | 37°C |
| Typ IIS RE | Nein |
| Menge | 1000 E |
| Produkttyp | Restriktionsenzym |
| Forschungskategorie | Herkömmliches Klonen |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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