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Thermo Scientific™ KpnI, HC (50 U/μL)
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Thermo Scientific™ KpnI ist als FastDigest Enzym erhältlich, das einen schnellen DNA-Verdau ermöglicht. Über 95 % der verdauten DNA-Fragmente können ligiert und dann erneut bei einer 5′-Termini-Konzentration von 0,02 μmol nach einem 50-fachen Überverdau (3 Units/μg DNA x 17 h) mit Kpnl geschnitten werden.
5'..G G T A C▵C...3'
3'..C▵C A T G G...5'
Bedingungen für 100 % Aktivität:
- 1x Puffer KpnI: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl2, 0,02 % Triton X-100 und 0,1 mg/ml BSA
- Bei 37°C inkubieren
Lagerungspuffer:
- KpnI wird geliefert in: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 25°C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
Methylierungseffekte:
- Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
- Dcm: möglicherweise Überlappung — keine Auswirkung
- CpG: möglicherweise Überlappung — keine Auswirkung
- EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoBI: keine Überlappung — keine Auswirkung
Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:
- Es sind mindestens 5 U der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich
Hinweis:
Eine hohe Glycerin-Konzentration (>5 %), ein pH-Wert von >8,0 oder ein hoher Enzymüberschuss können zu Star-Aktivität führen.
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 50 U/μl |
| Methylierungsempfindlichkeit | Nicht empfindlich für Dam-Methylierung, Dcm-Methylierung und CpG-Methylierung, Dcm-Methylierung und CpG-Methylierung, Not CpG Methylation-Sensitive |
| Enzym | Kpn I |
| Kompatibler Puffer | Spezial-Puffer (10x Puffer KpnI) |
| Empfindlich gegen Hitzeinaktivierung | Ja |
| Optimale Reaktionstemperatur | 37°C |
| Typ IIS RE | Nein |
| Menge | HC; 20.000 U |
| Produkttyp | Restriktionsenzym |
| Forschungskategorie | Herkömmliches Klonen |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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