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Beschreibung
Thermo Scientific™ PvuII ist als FastDigest-Enzym verfügbar, das für schnellen DNA-Verdau verwendet wird. Über 90 % der verdauten DNA-Fragmente können ligiert und über 95 % dieser Stellen dann erneut bei einer 5′-Termini-Konzentration von 0,15 μM nach einem 10-fachen Verdau (5 Units/μg DNA x 2 h) mit PvuII geschnitten werden.
5'...C A G▵C T G...3'
3'...G T C▵G A C...5'
Bedingungen für 100 % Aktivität
- 1x Puffer G:10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl2, 50 mM NaCl und 0,1 mg/ml BSA
- Bei 37°C inkubieren
Lagerungspuffer
- PvuII wird geliefert in:10 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
Ligation und erneutes Schneiden
- Nach 10-fachem Verdau mit PvuII können über 90 % der DNA-Fragmente ligiert und über 95 % davon erneut geschnitten werden
Methylierungseffekte
- Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
- Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
- CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoBI: möglicherweise Überlappung — Auswirkung unbestimmt
Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA
- Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich
Hinweis:
Ein mehr als 15-facher Überverdau mit PvuII kann zu Star-Aktivität führen.
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 50 U/μl |
| Methylierungsempfindlichkeit | Nicht empfindlich für Dam-Methylierung, Dcm-Methylierung und CpG-Methylierung, Dcm-Methylierung und CpG-Methylierung, Not CpG Methylation-Sensitive |
| Enzym | Pvu II |
| Kompatibler Puffer | 10x Puffer G |
| Empfindlich gegen Hitzeinaktivierung | Nein |
| Optimale Reaktionstemperatur | 37°C |
| Typ IIS RE | Nein |
| Menge | 12.500 E |
| Produkttyp | Restriktionsenzym |
| Forschungskategorie | Herkömmliches Klonen |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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