Thermo Scientific™ RNase H (5 U/μl)

• Hydrolysiert keine Phosphodiesterbindungen in einzelsträngiger und doppelsträngiger DNA und RNA.

• Die Abwesenheit von Endo-, Exodeoxy- und Ribonukleasen wurde durch geeignete Qualitätstests bestätigt.

Quelle:

• E.coli MRE-600 Zellen

Molekulargewicht:

• 18,4 kDa Monomer

Definition der Aktivitätseinheit:

• Eine Einheit des Enzyms katalysiert bei 37 °C die Bildung von 1 nmol säurelöslichen Produkten innerhalb von 20 min.
• Die Enzymaktivität wird in folgender Mischung gemessen: 20 mM Tris-HCl (pH 7,8), 40 mM KCl, 8 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 24 μM [³H]-Poly(A)·Poly(dT), 0,03 mg/ml BSA, 4 % (v/v) Glycerin

• Das Enzym wird geliefert in: 25 mM HEPES-KOH (pH 8,0), 50 mM KCl, 0,1 mm EDTA, 1 mM DTT, 0,1 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

10-fach-Reaktionspuffer:

• 200 mM Tris-HCl (pH 7,8), 400 mM KCl, 80 mM MgCl₂, 10 mM DTT

Hemmung und Inaktivierung:

• Hemmstoffe: Metallchelatoren, SH-blockierende Reagenzien
• Inaktivierung durch 10-minütiges Erhitzen auf 65 °C.

Empfohlen für:

• Entfernung der mRNA vor der cDNA-Zweitstrangsynthese (1)
• RT-PCR und qRT-PCR: Entfernung von RNA nach der cDNA-Erststrangsynthese
• Entfernung der Poly(A)-Sequenzen von mRNA nach der Hybridisierung mit Oligo(dT) (2)
• Ortsspezifische Spaltung von RNA (3)
• Studien zu In-vitro-Polyadenylierungs-Reaktionsprodukten