Invitrogen™ eBioscience™ ELISA Ready-SET-Go!™ für humanes IFN-gamma Kit

Beschreibung

Das unbeschichtete ELISA-Kit für humanes Interferon gamma (IFNγ) enthält vorab aufeinander abgestimmte Antikörperpaare, Platten und Reagenzien für quantitative Enzye-Linked Immunosorbent-Assays (ELISA) zum Nachweis und zur Quantifizierung der Konzentration des humanen Proteins IFNγ.Waschpuffer und Stopplösung sind für die Durchführung der ELISA-Reaktion erforderlich und separat erhältlich.Funktionsprinzip der Methode ELISAs sind zur Messung der Zielmenge bestimmt, die zwischen einem zusammenpassenden Antikörperpaar gebunden ist.Ein zielspezifischer Antikörper wird über Nacht auf den Boden der Wells einer Mikrotiterplatte beschichtet.Proben, Standards oder Kontrollen werden dann in diese Wells gegeben und binden an den immobilisierten Antikörper (Capture).Durch Zugabe des zweiten (Detektor-)Antikörpers entsteht ein Sandwich, dann wird eine Substratlösung hinzugefügt, die mit dem Enzym-Antikörper-Zielkomplex reagiert, um ein messbares Signal zu erzeugen.Die Intensität dieses Signals ist direkt proportional zur Konzentration des in der Originalprobe vorhandenen Ziels.

IFN-gamma (Interferon-Gamma, Typ-II-Interferon) ist ein Makrophagen-Aktivierungsfaktor und ein immunes Interferon, das hauptsächlich von T-Lymphozyten und natürlichen Killerzellen als Reaktion auf Antigene, Mitogene, Staphylococcus Enterotoxin B, Phytohämaglutanin und andere Zytokine produziert wird. IFN-gamma ist ein dimerisches Protein, das aus zwei 146-Aminosäureuntereinheiten besteht. IFN-gamma ist ein Glykoprotein, das funktionell als Homodimer mit ungefähr 45 kDa existiert. Auf SDS-PAGE erscheint IFN-Gamma als Kombination von 25, 20 und kleinen 15,5 kDa Banden infolge der differenziellen Glykosylierung. Die biologische Aktivität des IFN-gamma-Homodimers ist hochgradig speziesspezifisch. Humanes IFN-gamma zeigt keine Kreuzreaktivität mit Maus. Die IFN-gamma-Funktion umfasst folgende Funktionen: antivirale Aktivität, antiproliferative Aktivität des Tumors, Induktion von MHC der Klasse I und II, Makrophagen-Aktivierung und verbesserte Immunglobulin-Sekretion durch B-Lymphozyten. IFN-gamma ist an der Zytokin-Regulierung beteiligt und wirkt auch synergistisch mit anderen Zytokinen. Die Aktivierung des IFN-gamma-Wertes erfolgt durch Bindung des IFN-gamma-Rezeptors I und II und Aktivierung des JAK-STAT-Pfades. IFN-gamma zeigt keine Homologie mit IFN-alpha oder IFN-beta, aber humanes IFN-gamma zeigt ungefähr 40 % Sequenzhomologie mit Maus IFN-gamma. IFN-gamma wird von IL2, FGF-basic, EGF hoch- und von Vitamin D3 oder DMN runtergeregelt. IFN-gamma-Genmutationen sind mit aplastischer Anämie assoziiert.