Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET FXR Coactivator Assay Kit, goat

Beschreibung

Dieses Kit enthält Ziege-Tb-Anti-GST-Antikörper; die anderen Kit-Komponenten sind identisch mit Kit A15140:

Das LanthaScreen™ TR-FRET FXR (Farnesoid-X-Rezeptor)-Koaktivator-Assay-Kit bietet eine empfindliche und zuverlässige Methode für das Hochdurchsatz-Screening potenzieller FXR-Liganden als Agonisten der Koaktivatorrekrutierung. Das Kit verwendet einen mit Terbium (Tb) markierten Anti-GST-Antikörper, ein Fluorescein-markiertes Koaktivatorpeptid und eine FXR-Ligandenbindungsdomäne (FXR-LBD), die mit Glutathion-S-Transferase (GST) getaggt ist, im Format eines Assays mit einem homogenen gebrauchsfertigen Gemisch.

Zur Durchführung des LanthaScreen™ TR-FRET FXR-Koaktivator-Assays im Agonisten-Modus wird FXR-LBD zu Liganden-Testverbindungen hinzugefügt, gefolgt von einer Mischung aus Fluorescein-Koaktivatorpeptid und Tb-markiertem Anti-GST-Antikörper. Nach einer Inkubationszeit bei Raumtemperatur wird das 520 nm/495 nm-TR-FRET-Verhältnis berechnet und zur Bestimmung der EC50 aus einer Dosisreaktionskurve der Verbindung verwendet. Basierend auf der Biologie der FXR-Koaktivatorpeptid-Interaktion ist die EC50 des Liganden ein zusammengesetzter Wert für die Menge des Liganden, die zur Bindung an den Rezeptor, für eine Konformationsänderung und die Rekrutierung des Koaktivatorpeptids erforderlich ist (Abb. 1).