Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET RAR alpha Coactivator Assay Kit, goat

Beschreibung

Dieses Kit enthält Ziege-Tb-Anti-GST-Antikörper; die anderen Kit-Komponenten sind identisch mit Kit A15122:

Das LanthaScreen™ TR-FRET Retinsäurerezeptor (RAR)-alpha-Koaktivator-Assay-Kit bietet eine empfindliche und zuverlässige Methode für das Hochdurchsatz-Screening potenzieller RAR-alpha-Liganden als Agonisten der Koaktivatorrekrutierung. Das homogene Mix-and-Read-Assayformat ergibt einen zusammengesetzten Liganden-EC50-Wert, der die Menge an Ligand darstellt, die zur Bindung an den Rezeptor, zur Auswirkung einer Konformationsänderung und zur Rekrutierung von Koaktivator-Peptid erforderlich ist (Abbildung 1).

Funktionsweise
Das LanthaScreen™ TR-FRET RAR-alpha-Koaktivator-Assay-Kit enthält einen Terbium(Tb)-markierten Anti-GST-Antikörper, ein Fluorescein-markiertes Koaktivator-Peptid und eine humane RAR-alpha-Ligandenbindungsdomäne (RAR-alpha-LBD), die mit Glutathion-S-Transferase (GST) markiert ist. Zur Ausführung des Assays wird RAR-alpha-LBD zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben, gefolgt von einer Mischung aus dem Fluorescein-Koaktivatorpeptid und dem Tb-Anti-GST-Antikörper. Nach der Inkubation bei Raumtemperatur wird das TR-FRET 520:495-Emissionsverhältnis berechnet und zur Bestimmung der EC50 anhand einer Dosisreaktionskurve der Verbindung verwendet.

Inhalt und Lagerung:
Das LanthaScreen™ TR-FRET-Koaktivator-Assay-Kit für RAR-alpha enthält das RAR-alpha-LBD (GST)-Protein, fluoreszierend markiertes D22-Koaktivatorpeptid, Tb-Anti-GST-Antikörper und mehrere Puffer. Lagerung der Komponenten wie im Assay-Protokoll angegeben (-80 °C, -20 °C oder +4 °C).