Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET RXR alpha Coactivator Assay Kit, goat

Beschreibung

Dieses Kit enthält Ziege-Tb-Anti-GST-Antikörper; die anderen Kit-Komponenten sind identisch mit Kit A15138:

Der LanthaScreen™ Assay für TR-FRET-Retinoid-X-Rezeptor-alpha-Koaktivator bietet eine empfindliche und zuverlässige Methode für das Hochdurchsatz-Screening potenzieller RXR-alpha-Liganden als Agonisten der ligangenabhängigen Koaktivatorrekrutierung. Das Kit verwendet einen mit Terbium (Tb) markierten Anti-GST-Antikörper, ein Fluorescein-markiertes Koaktivatorpeptid und eine humane rekombinante RXR-alpha-Liganden-bindende Domäne (RXR-alpha-LBD), die mit Glutathion-S-Transferase (GST) markiert ist, in einem homogenen „Mix-and-Read“-Assay-Format.

Zur Ausführung des Assays:
Bei der Ausführung des LanthaScreen™ TR-FRET Assays für Retinoid-X-Rezeptor-alpha-Koaktivator im Agonisten-Modus (zum Nachweis von Agonistenverbindungen) wird RXR-alpha-LBD zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben, gefolgt von einem Gemisch aus dem Fluorescein-Koaktivatorpeptid und Tb-markiertem Anti-GST-Antikörper. Nach einer Inkubationszeit bei Raumtemperatur wird das TR-FRET-Verhältnis von 520/495 berechnet und kann zur Bestimmung von EC50 aus einer Dosisreaktionskurve der Verbindung verwendet werden. Basierend auf der Biologie der RXR-alpha-Koaktivatorpeptid-Interaktion ist die EC50 dieses Liganden ein zusammengesetzter Wert für die Menge des Liganden, die für die Bindung an den Rezeptor, für eine Konformationsänderung und die Rekrutierung des Koaktivatorpeptids erforderlich ist (siehe Abb. 1).