Invitrogen™ Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 HCS Assay

Der Click-iT EdU Alexa Fluor 647 HCS-Assay ist eine hervorragende Alternative zu herkömmlichen Proliferationsassays und optimiert für High-Content-Bildgebungsanwendungen. Bei diesem Assay wird das geänderte Thymidin-Analogon EdU effizient in neu synthetisierte DNA integriert und mit einem hellen, lichtbeständigen Alexa Fluor Farbstoff bei einer raschen, höchst spezifischen Click-Reaktion fluoreszenzmarkiert. Diese Fluoreszenzmarkierung proliferierender Zellen ist präzise und kompatibel mit Antikörper-Methoden aufgrund des schonenden Click-Protokolls. Die genauesten Proliferations-/Detektionsverfahren basieren auf der Einbindung und Messung von Nukleosid-Analoga in neu synthetisierter DNA mit Bromdesoxyuridin (BrdU), einem häufig verwendeten Analog. BrdU-markierte DNA wird mit Anti-BrdU-Antikörpern nach der DNA-Denaturierung durch Eingriffe wie HCL, Hitze oder Enzyme zur Freilegung der BrdU-Moleküle quantifiziert. Dieser Schritt ist jedoch zeitaufwändig und dauerhaft kaum auszuführen. Diese Eingriffe können sich zudem negativ auf die Probenintegrität und -qualität auswirken, wodurch rinr Co-Färbung mit anderen Antikörpern zur Herausforderung wird.

• Einfach: funktioniert beim ersten Mal, jedes Mal und in kürzerer Zeit
• Effizient: keine Denaturierungsschritte oder eingreifende Verfahren erforderlich
• Inhaltsreiche Ergebnisse: bessere Erhaltung der Zellmorphologie, Antigenstruktur und DNA-Integrität
• Konsistenz: hängt für eine Erkennung nicht von variablen Antikörper-Chargen ab
• Weniger gefährlich

Hervorragende Proliferationsmethodik
Der Click-iT EdU Alexa Fluor 647 HCS Assay ist eine hervorragende Alternative zu BrdU-Assays für Messungen der Zellproliferation. EdU (5-Ethinyl-2'-Desoxyuridin) ist ein Nukleosid-Analogon von Thymidin und wird während der aktiven DNA-Synthese in DNA eingebunden. Mit Click-iT EdU sind eine schonende Fixierung und Lösungsmittelpermeabilisierung für das kleinmolekülige Click-iT EdU-Detektionsreagenz ausreichend, um Zugang zur DNA zu erhalten. Das Click-iT EdU HCS Assay ist deshalb nicht nur einfach anzuwenden, sondern in der Zellzyklusanalyse und anderen intra- oder extrazellulären Analysen präziser und kompatibel für höchst aussagekräftige Ergebnisse.

Click-iT® Assays eignen sich für Zellen in Kulturen und in vivo nach der EdU-Zugabe über Zuführungs- oder Injektionsmethoden. Click-iT Assays können mit BrdU für Doppelimpulsexperimente unter Anwendung von Anti-BrdU-Antikörper (MoBu-1 geklont) verwendet werden, ohne dass Kreuzreaktionen mit EdU auftreten. Die Click-iT® Technologie ist kompatibel mit immunhistochemischen, immunzytochemischen und Fluoreszenz-Farbstoffen, die fixierungstolerant oder für die Markierung fixierter Zellen vorgesehen sind.

Zellanalyse, Zellzyklus, Zellproliferation, Zellviabilität, Proliferation und Funktion, Zelluläre Bildgebung, DNA-Replikation und -Reparatur, High-Content-Screening (HCS)