Invitrogen™ EnzChek™ Pyrophosphat-Assay-Kit

Das EnzChek Pyrophosphat-Assay-Kit bietet einen schnellen und hochempfindlichen enzymatischen Assay zum Nachweis von freiem Pyrophosphat in Lösung. Bei diesem Assay wird die Bildung eines chromophorischen Produkts spektrophotometrisch nachgewiesen. Das EnzChek Pyrophosphat-Nachweis-Kit bietet eine schnelle, bequeme und kostengünstige spektrophotometrische Methode zur Messung des anorganischen Pyrophosphat, das durch eine Reihe biochemischer Reaktionen wie DNA- und RNA-Polymerisationen, zyklische AMP-Bildung durch das Enzym Adenylatcyclase und die enzymatische Aktivierung von Fettsäuren zur Bildung ihrer Coenzym-A-Estern hergestellt wird. Das EnzChek Pyrophosphat-Assay-Kit ist eine Modifikation unseres EnzChek Phosphat-Assay-Kits. In Gegenwart von anorganischem Phosphat wird das Substrat 2-Amino-6-mercapto-7-methylpurin-ribosid (MESG) von dem Enzym Purin-nukleosid-phosphorylase (PNP) in Ribose 1-phosphat und 2-Amino-6-mercapto-7-methylpurin umgewandelt. Die enzymatische Umwandlung von MESG führt zu einer Verschiebung des Absorptionsmaximums von 330 nm zu 360 nm. Das EnzChek Pyrophosphat-Assay-Kit enthält das Enzym anorganische Pyrophosphatase, das die Umwandlung von Pyrophosphat in zwei Phosphatäquivalente katalysiert. Das Phosphat wird dann von der MESG/PNP-Reaktion aufgebraucht und durch eine Steigerung der Absorption bei 360 nm nachgewiesen. Zusätzliche Empfindlichkeit wird durch die Amplifikation eines Moleküls Pyrophosphat in zwei Phosphatmoleküle gewonnen.

• Empfindlichkeitsgrenze von 1 mM Pyrophosphat (ca. 0,2 μg/ml)
• Umfasst einen pH-Bereich von 6,5 bis 8,5

Anionen-Nachweis, Zellanalyse, Zellmetabolismus, Zellviabilität, Proliferation und Funktion, Zelluläre Bildgebung, Arzneimittelforschung und -entwicklung, Enzym- und Protein-Aktivitäts-Assays, High-Content-Screening (HCS), Ionen-Homöostase und -Signalgebung, Phosphataseaktivität, Phosphatase-Aktivitäts-Assays, Biologie der Phosphatasen, Proteine, Expression, Isolierung und Analyse, Identifikation und Validierung von Ziel- und Leitstrukturen