Invitrogen™ Tali™ Apoptosis Kit - Annexin V Alexa Fluor™ 488 & Propidium Iodide

Beschreibung

Das TaliApoptosis Kit ermöglicht die Identifizierung apoptotischer Zellen. Das Kit färbt apoptotische Zellen mit grünem Annexin V – Alexa Fluor™ 488, färbt nekrotische Zellen sowohl mit rotem Propidiumjodid als auch mit grünem Annexin V – Alexa Fluor 488 und färbt keine lebenden Zellen.

Apoptose ist ein sorgfältig regulierter Prozess des Zelltodes, der als normaler Teil der Entwicklung auftritt. Unpassend regulierte Apoptose wird in den Krankheitszuständen, wie Alzheimer und Krebs impliziert. Apoptose unterscheidet sich von Nekrose durch charakteristische morphologische und biochemische Veränderungen, einschließlich Verdichtung und Fragmentierung des Kernchromatins, Schrumpfung des Zytoplasmas und Verlust der Membran-Asymmetrie.

Einfache Unterscheidung apoptotischer von nekrotischen Zellen mit zweifarbiger Färbung
In normalen lebenden Zellen befindet sich Phosphatidylserin (PS) an der zytoplasmatischen Oberfläche der Zellmembran. In apoptotischen Zellen wird PS jedoch von der inneren zur äußeren Oberfläche der Plasmamembran verlagert und dort der extrazellulären Umgebung ausgesetzt. Das humane Antikoagulans Annexin V weist eine hohe Affinität zu PS auf. Mit einem Fluorophor markiertes Antexin V wie Alexa Fluor 488 kann zur Identifizierung apoptotischer Zellen durch Bindung an die exponierte PS verwendet werden.

Das TaliApoptosis Kit enthält eine Lösung von Propidiumjodid (PI). PI ist ein zellundurchlässiger fluorogener DNA-bindender Farbstoff, der seit Jahren zur Identifizierung nekrotischer Zellen verwendet wurde. PI durchdringt keine lebenden Zellen, dringt aber leicht in tote Zellen ein, wo es an Nukleinsäuren bindet und fluoreszierend wird.

Nach dem Färben einer Zellpopulation mit dem TaliApoptosis Assay-Kit mit Antexin V-Alexa Fluor 488 und Propidiumiodid zeigen apoptotische Zellen grüne Fluoreszenz, tote Zellen rote und grüne Fluoreszenz und lebende Zellen zeigen wenig oder keine Fluoreszenz.

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