Thermo Scientific™ NcoI (10 U/μl)

5'...C▵C A T G G...3'

3'...G G T A C▵C...5'

Bedingungen für 100 % Aktivität:

• 1x Puffer Tango: 33 mM Tris-Acetat (pH 7,9 bei 37 °C), 10 mM Mg-Acetat, 66 mM K-Acetat und 0,1 mg/ml BSA
• Bei 37 °C inkubieren

Lagerungspuffer:

• NcoI wird geliefert in: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 25 °C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,5 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin

Ligation und erneutes Schneiden:

• Nach 50-fachem Verdau mit NcoI können über 95 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden

Methylierungseffekte:

• Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
• Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
• CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
• EcoBI: keine Überlappung — keine Auswirkung

Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:

• Es sind mindestens 5 Einheiten des Enzyms für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich

Kompatible Enden:

• AflIII, PscI, BtgI, Eco130I, FatI, PagI

Hinweis:

Eine geringe Salzkonzentration, eine hohe Glycerin-Konzentration (>5 %), ein pH-Wert von >8,0 oder ein hoher Enzymüberschuss können zu Star-Aktivität führen.