Invitrogen™ ELISA-Kit für humanes IR (Phospho) [pY1158]

Beschreibung

Kit is designed to detect and quantify the level of IR (Phospho) [pY1158] in fresh or frozen human cell lysates. Cross-reactivity with mouse and rat cells has been observed. The assay recognizes both natural and recomb. human IR (Phospho) [pY1158]. Principle of the method A monoclonal capture antibody specific for IR (Phospho) [pY1158] has been coated onto the wells of the 96-well plate. During the first incubation, standards of known content and unknown samples are pipetted into the wells and the antigen binds to the immobilized (capture) antibody. After washing, a rabbit antibody specific for the target protein is added to the wells and serves as a detection antibody by binding to the immobilized protein captured during the first incubation. After washing, a horseradish peroxidase labeled anti-rabbit IgG is added. This binds to the detection antibody to complete the four member sandwich. After a third incubation and washing to remove all the unbound enzyme, a substrate solution (TMB) is added, which is acted upon by the bound enzyme to produce color. The intensity of this colored product is directly proportional to the concentration of target protein present in the original specimen and the optical density can be read on a standard microplate reader. Rigorous validation Each manufactured lot of this ELISA kit is quality tested for criteria such as sensitivity, specificity, precision, and lot-to-lot consistency. See manual for more information on validation.

INSR (Insulinrezeptor, IR) ist ein heterodimerischer Proteinkomplex mit einer intrazellulären Beta-Untereinheit und einer extrazellulären Alpha-Untereinheit mit Disulfidbindung an ein Transmembransegment. Der Insulin-Ligand bindet an den IR und initiiert molekulare Signalwege, die die Glukoseaufnahme in Zellen und die Glykogensynthese fördern. Die Insulinbindung an den IR induziert die Phosphorylierung intrazellulärer Tyrosinkinase-Domänen und die Rekrutierung mehrerer SH2- und SH3-Domänen-haltiger intrazellulärer Proteine, die als Signalintermediate für pleiotrope Effekte von Insulin dienen. INSR- und IGF-1-Rezeptoren haben eine große strukturelle und funktionelle Ähnlichkeit. Die früheste zelluläre Reaktion auf die Insulinstimulation ist die Autophosphorylierung von Tyrosin im INSR. Beim Menschen befindet sich das INSR-Gen auf dem Chromosom 19. Defekte im INSR sind die Ursache verschiedener Insulinresistenzsyndrome, und IGF-1R-Defekte können auch zu einer Wachstumsverzögerung führen.

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