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OPTIZYME™ DPNI, Fisher BioReagents™

Artikelnummer. 11904852
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Menge:
500 E
Packungsgröße:
1 Stück
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Artikelnummer. 11904852

Marke: Fisher BioReagents BP80091

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5'...G m6A^T C...3'
3'...C T^m6A G...5'

Im Lieferumfang enthalten: 10x OPTIZYME Puffer 4
Bedingungen für 100 %-Aktivität:

  • 1x OPTIZYME Puffer 4: 33 mM Tris-Acetat (pH 7.9 bei 37 °C), 10 mM Mg-Acetat, 66 mM K-Acetat und 0.1 mg/ml BSA
  • Bei 37 °C inkubieren
Enzymaktivität in OPTIZYME Puffern:
  • Puffer 1: 100 %
  • Puffer 2: 100 %
  • Puffer 3: 50 Bis 100 %
  • Puffer 4: 100 %
  • Puffer 5: 50 Bis 100 %
Lagerungspuffer:
  • 10 mM Tris-HCl (pH 7.4 bei 25 °C), 400 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
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  • Ligation und erneutes Schneiden:
  • Mehr als70 % der pBR322-DNA-Fragmente können Ligiert werden, und mehr als95 % davon können nach50-facher Überverdauung mit DPNI erneut geschnitten werden.
  • Hinweise:
    • DPNI erfordert das Vorhandensein von N6-Methyladenin innerhalb der Erkennungssequenz, um DNA zu spalten.
    • Dpnl spaltet ausschließlich vollständig-adenomethylierte Dam-Stellen. Hämi-adenomethylierte Dam-Standorte – DPNI spaltet 60-mal langsamer.
    • DPNI, Bsp143I und MboI erkennen alle dieselbe Sequenz, weisen jedoch unterschiedliche Methylierungsempfindlichkeiten und Spaltungsstellen auf.

    Methylierungseffekte:
    Dam: Schneidet keine Dam-DNA
    • Gm6ATC
  • (Schneidet nur Dam-methylierte DNA)
  • Dcm: Nie überlappend – keine Auswirkung
  • CpG: Kann überlappen – keine Auswirkung
    • 5'...Gm6A Tm5C G...3'
  • 3'...C Tm6A Gm5C...5'
  • (Schneidet nur Dam-methylierte DNA)
  • EcoKI: Nie überlappend – keine Auswirkung
  • EcoBI: Kann überlappen – Auswirkung unbestimmt
  • TRUSTED_SUSTAINABILITY

    Spezifikation

    Konzentration 10 U/μl
    Komponenten 10X OPTIZYME™ Puffer 4
    Inkubatortemperatur 37 °C
    pH 7.4
    Zur Verwendung mit (Anwendung) >70 % der pBR322-DNA-Fragmente können ligiert werden und >95 % davon können nach50-facher Überverdauung mit Dpnl erneut geschnitten werden
    Lagerungspuffer 10mM Tris HCl (pH 7.4 at 25°C), 400mM KCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 0.2mg/mL BSA, 50% Glycerol
    Inhalt und Lagerung Den Behälter dicht geschlossen halten
    Menge 500 E
    Schnittstelle GA.TC
    Produkttyp DpnI
    Form Flüssig
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