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LanthaScreen™ LanthaScreen™ TR-FRET Progesterone Receptor Coactivator Assay Kit
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Menge:
800 x 20 μL Assays
Packungsgröße:
800 Stück
Beschreibung
- Das LanthaScreen™ TR-FRET-Coaktivator-Assay-Kit für den Progesteronrezeptor bietet eine empfindliche und zuverlässige Methode für das Hochdurchsatz-Screening potenzieller Progesteronrezeptor (PR)-Liganden als Agonisten oder Antagonisten der ligandenabhängigen Coaktivator-Rekrutierung. Das Kit verwendet eine PR-Ligandenbindungsdomäne (PR-LBD), die mit Glutathion-S-Transferase (GST) (auch separat erhältlich), einem mit mit Terbium (Tb) markierten Anti-GST-Antikörper und einem mit Fluorescein markierten Coaktivator-Peptid in einem homogenen Mix-and-Read-Assayformat markiert ist.
- Agonisten-Modus – Wenn der LanthaScreen TR-FRET Progesteronrezeptor-Koaktivator-Assay im Agonisten-Modus läuft (zum Nachweis von Agonistenverbindungen), wird zunächst PR-LBD und dann ein Gemisch aus Fluorescein-Koaktivator-Peptid und Tb-Anti-GST-Antikörper zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben. Nach einer Inkubationszeit bei Raumtemperatur wird das TR-FRET-Verhältnis von 520 nm/495 nm berechnet und kann zur Bestimmung von EC50 aus einer Dosisreaktionskurve der Verbindung verwendet werden. Basierend auf der Biologie der PR-Koaktivatorpeptid-Interaktion ist die EC50 dieses Liganden ein zusammengesetzter Wert für die Menge des Liganden, die zur Bindung an den Rezeptor, für eine Konformationsänderung und die Rekrutierung des Koaktivatorpeptids erforderlich ist.
- Agonisten-Modus – Wenn der LanthaScreen™ TR-FRET Progesteronrezeptor-Koaktivator-Assay im Agonisten-Modus läuft (zum Nachweis von Agonistenverbindungen), wird zunächst PR-LBD und dann ein Gemisch aus Agonist, Fluorescein-Koaktivator-Peptid und Tb-Anti-GST-Antikörper zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben. Die in diesem Modus verwendete Konzentration von Agonisten ist die EC80-Konzentration, die durch die erste Ausführung des Assays im Agonisten-Modus bestimmt wurde.
Spezifikation
Spezifikation
| Inhalt und Lagerung | 1 Röhrchen rekombinantes Protein mit PR-Ligandenbindungsdomäne (bei -68 bis -85 °C lagern) 1 Röhrchen mit Peptid (bei -5 bis -30 °C lagern) 2 Flaschen TR-FRET-Puffer (bei -5 bis -30 °C lagern) 1 Röhrchen Tb-Anti-GST Ab (bei -5 bis -30 °C lagern) 1 Röhrchen mit DTT (bei -5 bis -30 °C lagern) |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | Assay für Interaktionen mit Kofaktoren, Kernrezeptorassay |
| Produktlinie | LanthaScreen |
| Menge | 800 x 20 μL Assays |
| Typ | TR-FRET Progesteron Rezeptor-Coaktivator-Assay-Kit |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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