Molecular Probes™ Violet Ratiometric Membrane Asymmetry Probe/Dead Cell Apoptosis Kit, for flow cytometry

Beschreibung

Das Violett Ratiometrische Membran-Asymmetrie-Sonde/Totzellen-Apoptose-Kit bietet eine einfache und schnelle Methode für den Nachweis der Apoptose mit Differenzierung toter Zellen mittels Durchflusszytometrie. Die Violett Ratiometrischer Membran-Asymmetrie-Sonde, 4'-N,N-diethylamino-6-(N,N,N-Dodecyl-Methylaminosulfopropyl)-methyl-3-Hydroxyflavon (F2N12S), ist ein neuartiger violett anregbarer Farbstoff für den Nachweis von Veränderungen der Membran-Asymmetrie während der Apoptose. Der Farbstoff zeigt eine ESIPT-Reaktion (Excited-State Intramolecular Proton Transfer), die zu einer dualen Fluoreszenz mit zwei Emissionsbändern entsprechend 530 nm und 585 nm führt und eine zweifarbige ratiometrische Reaktion auf Schwankungen der Oberflächenladung erzeugt. Ratiometrische Sonden bieten gegenüber herkömmlichen Fluorochrom-Reagenzien mehrere Vorteile. Die ratiometrische Sonde ist ein selbstkalibrierender absoluter Parameter der apoptotischen Transformation, der unabhängig von Sondenkonzentration, Zellgröße und Veränderungen an Geräten wie Schwankungen der Laserintensität oder Empfindlichkeit der Detektoren ist. Da die Apoptose die Oberflächenladung der äußeren Schicht der Plasmamembran verändert, kann die violette Membran-Asymmetriesonde F2N12S durch eine Änderung der relativen Intensität der beiden Emissionsbänder des Farbstoffs Veränderungen der Membran-Asymmetrie überwachen, die während der Apoptose auftreten. Die F2N12S-Sonde wird mit SYTOX(R) AADvanced Totzellfarbstoff kombiniert. Dieser Totzellfarbstoff kann nur die Zellmembran von apoptotischen oder nekrotischen Zellen im späten Stadium durchdringen, wodurch eine Unterscheidung von apoptotischen Zellen in einem frühen Stadium möglich ist. Proben können nach einer 5-minütigen Inkubation bei Raumtemperatur analysiert werden und erfordern keine speziellen Puffer oder Waschschritte. Dieses Kit kann mit anderen Reagenzien wie MitoProbe™ DiIC1(5) oder Annexin V zwecks multiparametrischer Analyse von Apoptose und Viabilität kombiniert werden. Mit diesem Reagenz-Kit können Forscher den Nutzen ihrer Geräte durch Verwendung des violetten Lasers maximieren. Jedes Kit enthält ausreichend Reagenzien für ∼100 Durchflusszytometrietests.

Sehen Sie sich einen Auswahlleitfaden für alle Apoptose-Assays für die Durchflusszytometrie an.