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Invitrogen™ Click-iT™ TUNEL Colorimetric IHC Detection Kit
Click-iT TUNEL kolorimetrisches IHC-Nachweiskit
Marke: Invitrogen™ C10625
Weitere Details : Netto-Gewicht : 0.14300kg
Beschreibung
Das Click-iT™ TUNEL Colorimetric IHC Detection Kit dient zur Identifizierung apoptotischer Zellen in Gewebe- und kultivierten Zellproben durch die Verwendung eines kleinen, hochspezifischen Beschriftungsriegels und Streptavidin-Peroxidase-Konjugation. Nach der Integration der Markierung in DNA-Fragmentierungsstellen wird die Detektion durch eine katalysierte Klickreaktion erreicht, die an diesen Stellen eine Biotin-Gruppe hinzufügt. Die anschließende Zugabe eines Streptavidin-Peroxidase- und Peroxidase-Substrats führt zu einem dunkelbraunen Signal, das mit Lichtmikroskopie erkannt und für zukünftige Analysen gespeichert werden kann.Weitere Tools für die bildbasierte Erkennung apoptotischer Zellen >
Die späteren Phasen der Apoptose sind durch Veränderungen in der nukleare Morphologie, Kondensation des Kernchromatins, Kernhüllenzersetzung und DNA-Fragmentierung gekennzeichnet. Die TUNEL-Assays (Terminal Desoxynucleotidyl-Transferase-dUTP Nick End Labeling) basieren auf der Einbindung modifizierter DUTPs durch die endale Desoxynucleotidyl-Transferase (TdT) an den 3’-OH-Enden fragmentierter DNA. Kolorimetrische TUNEL-Assays verwenden DUTPs, die mit einem Biotin-Anteil konjugiert sind, gefolgt von einem Streptavidin-Peroxidase-Konjugat und einem Peroxidase-Substrat, was zu einem dunkelbraunen apoptotischen Signal führt. Kolorimetrische TUNEL-Assays sind jedoch anfällig für hohen Hintergrund, was die Empfindlichkeit und Spezifität des Signals verringert.
Das Click-iT TUNEL Colorimetric IHC Detection Kit wurde entwickelt, um diese Probleme zu beheben, indem ein dUTP verwendet wurde, das mit einer Alkyne-Gruppe (einer kleinen bio-orthogonalen Funktionsgruppe) modifiziert wurde, die eine bessere Integration des Nukleotids durch TdT ermöglicht. Nach der Eingemeindung verbindet eine hochspezifische Klickreaktion kovalent Biotin Azid und die Alkyne-Gruppe. Streptavidin-Peroxidase (Meerrettichperoxidase), gefolgt von Peroxidase-Substrat (DAB), ermöglicht den kolorimetrischen Nachweis apoptotischer Zellen. Der hohe Grad an Kennzeichnungspezifität, der der Klicktechnologie innewohnt, führt zu einem niedrigen Hintergrund und verbessert den Nachweis apoptotischer Zellen.
Das Click-iT TUNEL Colorimetric IHC Detection Kit wurde optimiert und enthält alle Reagenzien für den Nachweis apoptotischer Zellen aus Gewebe- oder Zellproben. Die Reagenzien in diesem Kit reichen zum Testen von 50 Proben und und können für die gleichzeitige Analyse von 1 bis 50 Proben verwendet werden.
Spezifikation
| Objektträger | |
| Gemischtlagerung der Kit-Komponenten: 2 bis 8 °C und -5 bis -30 °C. | |
| Click-iT™ | |
| EVOS™ XL Core Imaging System, EVOS™ XL Imaging System |
| TUNEL Kolorimetrisches IHC-Nachweiskit | |
| Trockeneis | |
| Kolorimetrisch |
Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.