Invitrogen™ CellLight™ Plasma Membrane-CFP, BacMam 2.0

Dieses gebrauchsfertige Konstrukt wird mithilfe der BacMam 2.0-Technologie in Zellen transfiziert, wo es CFP mit der Myristolyations-/Palmitoylations-Sequenz von Lck-Tyrosinkinase fusioniert. Sie können das Verhalten von Plasmamembran-CFP in lebenden Zellen ohne Färbung innerer Membranen beobachten und mehrere Tracking- oder Tracing-Farbstoffe verwenden, um dynamische zelluläre Prozesse abzubilden.

Zellen, die CellLight Konstrukte exprimieren, können auch mit Formaldehyd für die Multiplex-Bildgebung mit immunzytochemischen Verfahren fixiert werden.

BacMam Technology

CellLight Plasmamembran-GFP, BacMam 2.0, ist ein Verschmelzungskonstrukt der Myrisolyations-/Palmitoylationssequenz von Lck-Tyrosinkinase und CFP, das genaues und spezifisches Targeting für zelluläres Plasmamembran-GFP bietet. Dieses Verschmelzungskonstrukt ist im Insektenvirus Baculovirus verpackt, das in menschlichen Zellen nicht repliziert wird und in den meisten Labors als sicher für Bioschutzstufe (BSL) 1 ausgewiesen ist. Die BacMam Technologie sorgt dafür, dass die meisten Säugetierzelltypen mit hoher Effizienz und minimaler Toxizität transduziert, bzw. transfiziert werden. Diese transiente Transfektion kann nach einer über Nacht erfolgten Inkubation bis zu fünf Tage lang nachgewiesen werden – genügend Zeit für die meisten dynamischen Zellanalysen. Wie jede Transfektions-/Transduktionstechnik transfiziert/transduziert die BacMam Methode nicht alle Zellen mit der gleichen Effizienz, wodurch sie für Zellpopulationsuntersuchungen oder automatisierte Bildgebung/Zellzählung schlecht geeignet ist. CellLight Reagenzien sind ideal für Experimente geeignet, bei denen eine zelluläre oder subzelluläre Co-Lokalisierung erforderlich ist, oder für Zellfunktionsuntersuchungen, die eine spezielle Auflösung benötigen.

• Schnell und praktisch: Einfach das CellLight Reagenz auf die Zellen geben, über Nacht inkubieren, und das Ergebnis visualisieren oder die Assay-fertigen Zellen für eine spätere Verwendung einfrieren
• Hocheffizient: Bis zu 90 % Transduktion bei einer Vielzahl von Säugetierzelllinien, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und Neuronen
• Flexibel: Sie können mehr als ein BacMam Reagenz für Multiplex-Experimente oder Co-Lokalisierungsuntersuchungen co-transduzieren; engmaschige Überwachung der Expressionswerte, indem lediglich die Dosis geändert wird
• Weniger giftig: CellLight Reagenzien sind in Säugetierzellen nicht-replizierend und für Untersuchungen bei Biosicherheitsstufe (BSL) 1 geeignet
• Durchflusszytometer-Laserlinien: 405

Zellanalyse, Zellstruktur, Zelluläre Bildgebung, Immunzytochemie (ICC), Immunfluoreszenz (IF), Plasmamembran